產品簡介
pGM-Simple-T Fast Vector是基于pGM-T Vector改良的一種高效克隆PCR產物的專用載體,經由克隆質粒在XcmI內切酶酶切后得到的帶3’ T突出末端的線性化載體,通過該方法產生的帶有3’ T突出末端的線性化載體效率遠高于傳統酶切加尾法。由于大部分耐熱聚合酶反應時都會在PCR產物的3’端添加一個A,可與pGM Simple -T Fast Vector 3’端的T互補連接。此外,pGM-Simple-T Fast Vector突變掉pGM-T Vector的多克隆位點,以方便自行引入酶切位點。
試劑盒中配備了新型的RapiLigation Mix(目錄號:RT407)為高效的T4 DNA連接酶反應試劑,其中含有連接增強劑、酶穩(wěn)定劑,可大大縮短連接時間、提高PCR產物的連接和克隆效率。按不同需要配備了DH5?感受態(tài)細胞以及對照用超螺旋質粒,方便進行轉化。帶有插入片段的重組子可根據α互補原理,進行藍白斑篩選,判斷載體中有無外源基因的插入(白色克隆為陽性重組克隆,藍色的為載體自連的克隆,具體篩選原理參考分子克隆等書籍)??寺『?,可使用通用引物T7、SP6進行鑒定和測序。
產品特點
高效快速: 5 min快速連接,陽性率近100%。
靈敏廣泛:適合低至0.025 pmol濃度片段和長至8 kb片段的高效連接。
無多克隆位點: 載體自身無多克隆位點,方便自行引入酶切位點。
載體圖譜
pGM-Simple-T Fast Vector多克隆位點